99久久久无码国产精品6,朝鲜少妇xxxx做受,欧美三级在线播放,国产女人乱人伦精品一区二区

您好,歡迎進(jìn)入研域(上海)化學(xué)試劑有限公司網(wǎng)站!
一鍵分享網(wǎng)站到:
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    發(fā)布時(shí)間: 2011-10-24  點(diǎn)擊次數(shù): 3051次

    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體

    HRP分子中與酶活性無關(guān)的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發(fā)生自身偶聯(lián),在標(biāo)記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結(jié)合反應(yīng)后,再加入硼氫化鈉還原成穩(wěn)定的結(jié)合物。

    (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中,加入1%DNFB無水乙醇溶液0.1ml,室溫下輕微攪拌1h;
    (2) 加入新鮮配置的0.1mol/L NaIO4 0.5ml,此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色,置4℃放置30min,此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色;
    (3) 加入2.5%乙二醇1ml, 室溫下輕微攪拌1h,終止反應(yīng);
    (4) 加入待標(biāo)記的抗體5-10mg, 用1.0mol/L, pH9.5 CBS,調(diào)節(jié)pH值至9.0;
    (5) 混勻,置4℃過夜改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
    (6) 加入硼氫化鈉溶液0.1ml,混勻,4℃放置3h;
    (7) 對(duì)0.01mol/L,pH7.4 PBS,4℃透析過夜,換液3次;
    (8) 3000r/min離心30min,去除沉淀物;
    (9) 收集上清液即為酶標(biāo)記抗體。

    【注意事項(xiàng)】
    (1) 在氧化HRP時(shí),以pH5.6醋酸鹽緩沖液溶解酶為宜。
    (2) 一般認(rèn)為氧化HRP 5mg, NaIO4量以0.06mol/L 0.5ml為宜,不能低于0.015mol/L 0.5ml。
    (3) 氧化HRP時(shí)間以15-30min為宜。
    (4) 加入DNFB的目的是為了封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。
    (5) 加入乙二醇的目的是終止反應(yīng);為便于在加入抗體后調(diào)pH值,故乙二醇要用0.05mol/L CBS配制。
    改良過碘酸鈉標(biāo)記法制備酶標(biāo)抗體
     

產(chǎn)品中心 Products
在線客服 聯(lián)系方式

服務(wù)熱線

021-54479081
021-54461587

天美传媒免费观看一二三在线| 成年女人午夜毛片免费视频| gv天堂gv无码男同在线观看| 亚洲女初尝黑人巨高清| 小蜜被两老头吸奶头在线观看| 亚洲AV无码有乱码在线观看| 一本一本久久a久久精品综合麻豆| 欧美日韩一区二区三区自拍| 亚洲精品无码久久久久| 亚洲AV无码一区二区一二区| 国产东北露脸熟妇| 无码精品黑人一区二区三区 | 国产精品亚洲精品日韩已满| 国产色爱AV资源综合区| 亚洲最大成人av在线天堂网| av无码久久久久久不卡网站| 日本XXXX18裸体XXXX| 公侵犯玩弄漂亮人妻优| 国产成年无码av片在线| 欧美黑人又大又粗xxxxx| 国产欧美精品一区二区三区四区 | 中文区中文字幕免费看| 国产精品一卡二卡三卡,| 久久人爽人人爽人人片AV| 无码专区人妻系列日韩精品| 最近免费观看在线中文2019| 少妇看a片偷人精品视频| 中文精品久久久久人妻不卡 | 无码国产69精品久久久久APP | 韩国精品无码少妇在线观看| 女人三a级毛片视频 | 日韩人妻无码一区二区三区| 熟妇女人妻丰满少妇中文字幕| 国产露脸精品产三级国产av | 国产特级毛片aaaaaaa高清| 无码国产色欲XXXXX视频| 色窝窝无码一区二区三区成人网站 | 亚洲熟妇无码一区二区三区导航| 国产偷国产偷亚洲清高| 国产精品人妻一区夜夜爱| 久久99亚洲网美利坚合众国|