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    上海研域生物無菌實驗室在操作注意使用方法

    發(fā)布時間: 2025-02-16  點擊次數(shù): 111次


    1.玻璃器皿的消毒和清潔

    新購玻璃器皿的處理新購玻璃器皿應(yīng)用熱番筧水洗刷,流水沖刷,再用1%~2%鹽酸溶液浸泡,以除去游離堿,再用水沖刷。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等,經(jīng)清水洗凈后應(yīng)注入濃鹽酸少量,漸漸滾動,使鹽酸布滿容器內(nèi)壁數(shù)分鐘后傾出鹽酸,再用水沖刷。

    2.污染玻璃器皿的處理

    ①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡,再煮沸30分鐘,亦可用番筧或合成洗滌劑洗刷使盡量發(fā)生泡沫,然后用清水沖刷至無番筧停止。然后用少量蒸餾水沖刷。

    ②細(xì)菌培育用的試管和培育皿可先行集中,用1kg/cm2高壓滅菌15~30分鐘,再用熱水洗滌后,用番筧洗刷,流水沖刷。

    ③吸管運用后應(yīng)集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小時,逐支用流水重復(fù)沖刷,再用蒸餾水沖刷。

    ④油蠟沾污的器皿,應(yīng)獨自滅菌洗滌,先將沾有油污的物質(zhì)棄去,倒置于吸水紙上,100℃烘干半小時,再用堿水煮沸,番筧洗滌,流水沖刷。必要時可用二jia苯祛污

    ⑤染料沾污的器皿,可先用水沖刷,后用清潔或稀鹽酸洗脫染料,再用清水沖刷。一般染色劑呈堿性,所以不宜用番筧的堿水洗滌。

    ⑥玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡,取出后流水沖刷,再用番筧或弱堿性煮沸,自然冷卻后,流水沖刷。被結(jié)核桿菌污染或不易洗凈的玻片,可置于清潔液內(nèi)浸泡后再沖刷。

    3.無菌器材和液體的預(yù)備

    將玻璃用具中的培育皿、培育瓶、試管、吸管等按上述辦法洗凈烘干后,用一潔凈紙包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花,裝入干凈的鋁盒或鐵盒中,于120℃的干燥箱中干燥滅菌2小時,取出備用。關(guān)于手術(shù)器械、瓶塞、作業(yè)服以及新制造的PBS洗液,則選用高壓蒸氣滅菌法,即在15磅的條件下,加熱20分鐘。而關(guān)于MEM培育液、小牛血清和消化液等需用G5或G6濾器負(fù)壓抽濾后運用。

    4.在無菌操作過程中,重要的是要堅持作業(yè)區(qū)的無菌、清潔。

    因而,在操作前20~30分鐘要先啟動超凈臺和紫外燈,并仔細(xì)洗手和消毒。在操作時,禁止喧嘩,禁止用手直接拿無菌物品,如瓶塞等,而必須用消毒的止血鉗、鑷子等。培育瓶應(yīng)在超凈臺內(nèi)操作,并且在開啟和加蓋瓶塞時需重復(fù)用酒精燈燒。關(guān)于吸管應(yīng)先用手拿后1/3處,戴上膠皮ru tou,并用酒精燈燒烤之后再吸液體。

    5.常用清潔液的制造法

    ①重鉻suan鉀清潔液:可根據(jù)不同需要,選用下列的任何一種濃度。先將重鉻suan鉀溶于水中,再漸漸參加濃硫酸。注意,此時可發(fā)生高熱,應(yīng)防止容器破裂。重鉻suan鉀清潔液除污力強(qiáng),腐蝕性大,應(yīng)避免觸摸皮膚和衣服。為防止吸收空氣的水分而變質(zhì),此液應(yīng)貯存于帶蓋的容器中。如清潔效能較差,可再參加少量重鉻suan鉀及濃硫酸,還可持續(xù)運用。直到液體變藍(lán)綠色,即不能再用。制造重鉻suan鉀清潔液時,宜用耐高溫的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑料容器。運用玻璃器皿時,應(yīng)特別注意防止發(fā)生高熱而破裂,切忌用量筒來制造。

    ②磷酸三鈉將其配成5%~10%水溶液,可用于洗滌玻璃器皿上的油污,但經(jīng)常運用腐蝕玻璃,使器皿表面含糊、粗糙。


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