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    小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125酶聯(lián)免疫分析

    發(fā)布時(shí)間: 2016/5/3  點(diǎn)擊次數(shù): 661次
    提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大?。?/td>
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    小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125酶聯(lián)免疫分析
    本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中卵巢癌標(biāo)志物 CA125含量。
    實(shí)驗(yàn)原理
    本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠卵巢癌標(biāo)志物 CA125  水平。用純化的小鼠
    卵巢癌標(biāo)志物 CA125  抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入卵巢
    癌標(biāo)志物 CA125,再與 HRP標(biāo)記的卵巢癌標(biāo)志物  CA125抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗
    體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在
    酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的卵巢癌標(biāo)志物 CA125  呈正相關(guān)。用
    酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠卵巢癌標(biāo)志物
    標(biāo)本要求
    1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
    馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125酶聯(lián)免疫分析操作步驟
    1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
    釋.

    顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
    15分鐘.
    10.終止:每孔加終止液    50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn))。
    11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止
    液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
    操作程序總結(jié):
    計(jì)算
    以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo), OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的
    OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與  OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

    小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125酶聯(lián)免疫分析注意事項(xiàng)
    1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
    用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
    2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
    3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
    控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
    4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值
    大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)
    算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物請避光保存。
    7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
    9.本試劑不同批號組分不得混用。
    10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
    保存條件及有效期
    1.試劑盒保存:;2-8℃。
    2.有效期:6個(gè)月

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