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    如何讓干細(xì)胞不分化 新型培養(yǎng)基來(lái)幫忙

    發(fā)布時(shí)間: 2010/5/4  點(diǎn)擊次數(shù): 1611次
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    以色列耶路撒冷哈達(dá)薩大學(xué)的研究人員近日開(kāi)發(fā)出一種新的干細(xì)胞培養(yǎng)基,能讓干細(xì)胞在更長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)不分化。這項(xiàng)研究是由哈達(dá)薩人類(lèi)胚胎干細(xì)胞研究中心的主管Benjamin Reubinoff領(lǐng)導(dǎo)的,發(fā)表在近期的《Nature Biotechnology》上。作者們相信這項(xiàng)技術(shù)將對(duì)臨床應(yīng)用所需的大量hESC特別有用。

    為了保持hESC存活且具有多能性,研究人員通常在滋養(yǎng)層細(xì)胞(也就是一層小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)上培養(yǎng),或者在微載體上成簇培養(yǎng)。但是在這些基質(zhì)上培養(yǎng)干細(xì)胞是相當(dāng)昂貴的,而且培養(yǎng)物不能在很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持未分化狀態(tài),盡管所有必需的生長(zhǎng)因子都存在。

     

    Reubinoff的研究團(tuán)隊(duì)正在研究hESC簇分化成神經(jīng)細(xì)胞,他們一直在使用Invitrogen的Neurobasal培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基能夠在無(wú)滋養(yǎng)層的條件下長(zhǎng)時(shí)間維持神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和正常表型。在研究過(guò)程中,研究人員注意到并非所有細(xì)胞都分化了。他們懷疑是培養(yǎng)基的選擇導(dǎo)致了這種現(xiàn)象,于是他們開(kāi)始集中精力研究培養(yǎng)基如何促進(jìn)干細(xì)胞生長(zhǎng)并抑制分化。

    為了驗(yàn)證他們的理論,研究小組定制了培養(yǎng)基。他們?cè)贜eurobasal培養(yǎng)基中加入了血清替代物,還加入了干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的蛋白,包括細(xì)胞外基質(zhì)組分、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2和活化素A。研究人員在常規(guī)的無(wú)血清培養(yǎng)基和定制培養(yǎng)基中培養(yǎng)了hESC。三個(gè)星期之后,定制培養(yǎng)基中存在更多的未分化hESC細(xì)胞。

    使用這種新的培養(yǎng)基,研究小組檢驗(yàn)了三種不同的hESC系。他們利用熒光激活細(xì)胞分選(FACS)在7周和20周后分析了培養(yǎng)物,發(fā)現(xiàn)90%的細(xì)胞仍維持多能性。這項(xiàng)突破為在計(jì)算機(jī)化的自動(dòng)系統(tǒng)中大規(guī)模擴(kuò)增胚胎干細(xì)胞創(chuàng)造了可能性。此外,通過(guò)改變培養(yǎng)條件,還可能進(jìn)一步指導(dǎo)干細(xì)胞長(zhǎng)成特定的細(xì)胞類(lèi)型,用于研究或病人的移植。

    然而,研究小組也承認(rèn),他們的方法并不。在細(xì)胞傳代過(guò)程中,他們丟失的細(xì)胞數(shù)是滋養(yǎng)層培養(yǎng)方法的近3倍。他們還將繼續(xù)完善這種技術(shù),以確保培養(yǎng)產(chǎn)量盡可能地高。

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