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    生化分析儀酶測驗不準確原因分析

    發(fā)布時間: 2011/5/12  點擊次數(shù): 706次
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    生化分析儀酶測驗不準確原因分析

    生化分析儀酶的測定一般用動力學(xué)法進行測試,其原理是在酶反應(yīng)的zui適條件下,用物理、化學(xué)或酶促反應(yīng)的分析方法,在反應(yīng)速度恒定期與被測物的活性或濃度成正比。計算方法有兩種:

    1)相對法:
    (U/L或mmol/L)=[ΔA(測定)/ΔA(標準)]×標準物的活力或濃度
    因此,生化分析儀酶的測定與許多條件有關(guān)。條件的設(shè)置,如:波長、溫度、參數(shù)、測試方法,延遲和測試時間,吸液量等。另外還與廠家的試劑,樣品的采集、保存有關(guān),同時與及時進行質(zhì)控,從一個樣品進入另一個樣品測試時及時清洗也有很大關(guān)系。

    2)法:
    酶活力(U/L)=ΔA×(反應(yīng)液體積/樣品體積)×(1000/消光系數(shù))
    因此GPT的測試結(jié)果與以下幾點有關(guān):
    1、340nm為波長低端,能量較低,同時340nm濾光片使用較多,易老化。所以波長漂移不準,半寬度變化都會影響測量的準確度和重復(fù)性。
    2、動態(tài)法測試有延遲時間,測試時間要求。延遲時間在動態(tài)法中為預(yù)反應(yīng)時間,測試時間在動態(tài)法中為測試的總時間。零級動力學(xué)法是針對特定時間段而言的,酶反應(yīng)剛啟動時反應(yīng)比較復(fù)雜,雜反應(yīng)較多,必需經(jīng)過一段延遲時間才能進入穩(wěn)定反應(yīng)期,各試劑商對這兩段時間有嚴格規(guī)定。所以動態(tài)法測試一般溫度在37℃,延遲時間不少于15秒為好。
    3、對于參數(shù)的輸入應(yīng)按試劑要求輸入其給定值,一般試劑商在試劑盒說明書中給予說明。
    4、反應(yīng)溫度。
    5、測試空白要準確。
    6、吸液量的大小直接影響交叉污染和測量的重復(fù)性,建議測試污染性大的物質(zhì)試劑量應(yīng)相應(yīng)增加。一般應(yīng)大于400μl,一般項目為500μl即可。
    7、測試不準確、重復(fù)性差從操作上看主要有:儀器本身原因如比色杯中有氣泡;光源燈老化;光源電壓不穩(wěn);340nm濾光片性能變差,透射性變小;波長不準確等有關(guān)。一般檢查液路接口是否松動漏氣,更換光源燈泡和340nm濾光片即可解決。至于電路問題,加熱元件損壞,溫度不受控的問題只能由工程師解決。


    總之酶的測定影響準確度的因素很多,只要認真操作,綜合分析影響測定的各項因素,認真分析,酶測定的問題不難解決的。

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